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拉曼光譜儀使用中如何選擇合適的激發波長?

時間:2022-03-26 點擊次數:269
近紅外的激發波長一般在700nm以上,常見的有785nm、830nm和1064nm。近紅外激發波長通常用于抑制熒光干擾。熒光需要吸收外來光才能發射。拉曼是一個簡單的光散射過程,沒有吸收。大多數樣品的熒光吸收帶位于可見部分,只有少數材料的吸收帶位于近紅外區域,因此近紅外激光對大多數被測樣品不會產生熒光。另一方面,拉曼則正常出現。當樣品在可見光激發下有較強的熒光干擾時,采用近紅外拉曼光譜是獲得高質量拉曼光譜的好方法。
然而,近紅外激光激發的低效率導致了靈敏度的降低。因此,785nm激光器激發的拉曼強度幾乎是532nm激光器激發的拉曼信號強度的1 / 5;1064nm激光器激發的拉曼信號強度只有532nm激光器激發的拉曼信號強度的1 / 15。此外,CCD探測器在近紅外部分的靈敏度也相對較低,所以與使用可見光激光測量相比,為了獲得相同的光譜質量,近紅外拉曼測量時間相對較長。
紫外激發波長的優點和缺點是什么?
紫外激發波長一般在350nm以下,常用266nm。與近紅外相似,熒光的吸收帶主要在可見波長段,熒光信號與拉曼不在同一區域(熒光也可能發生在近可見波長段)。雖然熒光信號比拉曼信號高很多,但不受熒光的干擾。許多生物樣品(如蛋白質、DNA、RNA等)與紫外激發波長產生共振,拉曼信號多次增強,為此類樣品的結構檢測提供了便利。此外,紫外激光在半導體材料中的穿透深度一般在幾個納米量級,因此可以對被測樣品表面的薄膜進行選擇性分析。紫外波長的激發效率高,可以以較低的功率激發拉曼信號。
但是,由于紫外激發波長的高熱效應,樣品在紫外激光照射下會燃燒或降解。同時,紫外線光束用肉眼是看不到的,紫外線激光體積較大,操作復雜,價格也比較昂貴,所以紫外線拉曼仍然需要專業的技術人員來操作。
在這樣多種激發波長的拉曼光譜儀中(激光器與光譜儀一般是配對的,不可能為同一光譜儀購買多個激發波長的激光器),根據自身需要檢測樣品的特性,選擇合適的激發波長。應考慮熒光干擾和共振增強。


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